犬糞包蟲抗原ELISA試劑盒使用說明書

           更新時間:2019-06-19       瀏覽量:
      【產品名稱】
      通用名稱:犬糞包蟲抗原ELISA檢測試劑盒
      英文名稱:Hydatid( Hyd) coproantigens Test Kit for Canine.
      【用途】 本試劑盒采用夾心ELISA方法定性檢測犬糞中包蟲抗原。
      規格】 96T/盒,192T/盒
      【儲藏與有效期】 2~8℃保存,有效期12個月。
      【試劑盒組成】
      名稱 數量 名稱 數量
      包被板 96T/192T 終止液 15mL
      酶標結合物 12mL/ 22mL 陽性對照 0.8mL
      洗滌液10× 100 mL 陰性對照 0.8mL
      底物液 15mL 封板膜 3片/6片
      顯色液 15mL 說明書 1份
      樣品稀釋液2X 100mL    
       
      【溶液配制】
      1.洗滌液配制:用蒸餾水或去離子水將洗滌液 10×按 1:10 稀釋,充分混勻即為工作濃度洗滌液。
      2.樣品稀釋液配制:用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液 2×按1:1 稀釋(如取100mL 濃縮樣品稀釋液加 100mL 蒸餾水或去離子水),充分混勻即為工作濃度樣品稀釋液。
      【實驗準備】所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
      【樣品要求】
      1. 本試劑適用于檢測犬糞樣品;
      2. 應采集新鮮的犬糞樣品進行測試。若不能及時檢測,應將糞樣低溫凍存,防止腐敗或反復凍融。如犬糞難以溶解,應適當搗碎處理。
      【操作步驟】
      1.樣品處理:犬糞樣品需要預先低溫( -70℃以下) 冷凍 7 天以上,以滅活蟲卵。稱取 1克犬糞,加入1mL樣品稀釋液,充分攪拌混勻,靜置10分鐘,再3000rpm離心10分鐘,取上清液待檢。
      2.加樣反應:樣品孔,每孔僅加入100μL待檢樣品;陰性對照2孔,每孔僅加入100μL陰性對照品;陽性對照 2 孔,每孔僅加入 100μL 陽性對照品。蓋好封板膜,37℃避光反應30分鐘。
      3.洗板:甩去孔內液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗板6 次,每次均需靜置1分鐘;最后一次甩凈,拍干。
      4.加酶反應:每孔加酶結合物100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應30分鐘。甩去孔內液體,如上洗板,拍干。
      5.顯色反應:按所需用量,臨用前取等體積底物液和顯色液充分混勻后每孔加100μL,蓋好封板膜,37℃避光反應10分鐘。
      6.終止反應:加終止液50μL,用酶標儀于450nm波長(630nm作為參比波長)讀取OD值。
      【結果判定】
      1. Cut-off 值(COV)=陰性對照平均OD值×2.1(陰性對照孔OD 值<0.15 時按0.15計)。
      2. 有效性判定:
      陰性對照孔 OD 值≤0.30( 若大于 0.30 則實驗無效);
      陽性對照孔 OD 值≥0.50( 若小于 0.50 則實驗無效)。
      判定標準
      樣品 OD 值≥COV, 判為包蟲抗原陽性;
      樣品 OD 值<COV, 判為包蟲抗原陰性。
      【檢驗方法的局限性】本試劑盒僅供篩查,不作為確診依據。
      【注意事項】
      1. 所有試劑使用前恢復至室溫(25℃左右),以免溫度過低影響抗原抗體反應。
      2. 實驗前應用溫度計檢查溫箱溫度,溫度過高或過低影響OD值高低。
      3. 包被板反應時嚴禁堆疊放置,應該平鋪且板間有空隙,不要離溫箱壁太近。
      4. 實驗所用移液器及設備應定期校準。
      5. 底物液和終止液對皮膚有刺激性,請帶手套注意個人防護。 
      【技術支持】 王金良                                   電話:0543-3403060
      僅供獸醫診斷使用



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      編輯:熊方方




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